樣本採集及實驗方法

樣本收集由參與公用程式完成。該計劃依賴我們的公用事業合作夥伴來正確收集,處理和存儲樣品,直到樣品被取得以運輸到實驗室 DCLS 為止。  

採集的樣本主要有兩種類型:採集樣本和複合樣本。  

  • 抓取樣品是一次收集的單一樣本。這種樣本代表樣本在收集樣本時流入處理廠的廢水。
  • 複合樣本是在 24 小時期內收集的個別樣本,然後組合成單一樣本。樣品可以根據設定的時間(例如,每 10 分鐘一次)或取決於進入廢水處理廠的流量。這種樣本代表了整天進入廢水處理廠的流量。

該實用程序提供附帶樣本的其他信息(元數據),例如樣本收集時間,收集日的流程和採樣點。在進行任何重大加工之前,所有樣本都在處理廠入口收集。

樣品運送到 DCLS 進行濃度、萃取和滴滴數字聚合酶鏈反應 (ddPCR) 分析。在15年 11 月2021日當週之前,提取的樣本被運送至漢普頓路衛生區 (HRSD) 的 NELAP 認證實驗室,透過 ddPCR 進行 SARS- COV 2分析。 本報告中顯示的基因目標是 ddCoV_N,是用於 ddPCR 廢水分析的 N 2 基因的修改版本[1]在無模板控件(NTC)中觀察到放大的量化結果將從分析中刪除。目前版本的實驗室協議的檢測限制 (v 2.0) 是 6、200 複本/L 廢水。所有低於檢測極限的濃度都會指定一個等於檢測極限的一半的值。 

 

實驗室協議版本 偵測限制 (LOD) 實驗室職責
第一章 2。0 6,200 濃度、萃取和 ddPCR 分析: DCLS
第一章 1。0 1,350 濃度和萃取: DCLS

滴數字聚合酶鏈反應(ddPCR)分析: HRSD

 

病毒載量根據方程 1 計算:

(1) 病毒載量(副本/天)= 病毒結構。(複本/公升) * 流量 (美元) ∗ (3785411.8左右)/(1 美國美國醫療保險)

 

按病毒載量按照每個站點計算百分位數,然後分成五分數(即 0-19。9 星期,20-39。9 星期,40-59。9 星期,60-79。9 星期,第 80-第 100)。網站特定的百分位數提供了一個指標,用於將當前週的數據與網站的歷史數據進行比較,這可以顯示每個站點的最高與最低負載的時間進行顏色視覺化。

參考文獻

[1] 岡薩雷斯,R.,拉森,A.,湯普森,H.,卡特,E.,& 卡西,XF(2021)。重新設計 SARS- COV 2臨床 RT-qPCR 檢測廢水 RT-ddPCR。 https://doi.org/10。1101/2021。03.02.21252754